中国药科大学学报  2021年第52卷第2期

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    专家视角
    2021,52(2):129-143, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210201
    [摘要] (294) [HTML] (85) [PDF 5.14 M] (255)
    摘要:
    一氧化氮(nitric oxide,NO)作为信使物质和/或效应分子在心血管、神经、免疫等系统中发挥着极其重要的作用。NO生成不足或信号传导异常与多种疾病的形成和发展密切相关,直接或间接调控体内NO水平及其相关代谢途径的研究已成为生物医学和药学领域研究的热点。本文介绍了体内NO的产生及其在心脑血管中的生理、病理作用,综述了本课题组在NO供体型心脑血管药物及相关药物研究方面所开展的工作,并对今后NO供体型心脑血管药物研究发展方向进行了展望。
    药学前沿
    2021,52(2):144-155, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210202
    [摘要] (128) [HTML] (35) [PDF 1.02 M] (536)
    摘要:
    慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一种以气流受限为主要特征的慢性呼吸道疾病,它与气道和肺部对有害气体或有毒颗粒的慢性炎性反应密切相关,并且有可能进一步发展为肺心病和呼吸衰竭。COPD发病机制复杂,目前普遍认为COPD是多种基因遗传与环境因素相互作用的结果,且尚无安全有效药物用于治疗该疾病。本文从氧化应激、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、免疫机制、细胞衰老和细胞修复机制、细胞坏死和细胞自噬等方面综述了COPD的发病机制,并分别介绍了潜在的治疗靶点以及相关药物的研究进展,主要包括β2受体激动剂、毒蕈碱拮抗剂、茶碱及其衍生物、靶向炎症介质的药物、蛋白酶抑制剂、激酶抑制剂、PED4抑制剂、腺苷受体调节剂、抗氧剂等,以期为COPD的新药研发提供参考。
    2021,52(2):156-163, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210203
    摘要:
    近年来,诸多报道表明致癌信号通路与代谢活动间存在密切联系,因此,研究者们开始认识到代谢重编程在肿瘤中的重要性。在肿瘤发生发展的过程中,乳腺肿瘤细胞经历代谢重编程,包括增强的糖酵解、三羧酸循环、谷氨酰胺分解和脂肪酸生物合成过程,然而不同亚型之间的代谢重编程会有所差异。此外,乳腺肿瘤细胞的代谢改变重塑了肿瘤的微环境,例如促进了肿瘤的血管形成和抑制机体的免疫防御机制,进而加速了肿瘤的进展。对当前乳腺癌代谢重编程以及微环境重塑的研究进展进行综述,能够为开发各乳腺癌亚型的代谢靶向药物提供一定理论依据。
    2021,52(2):164-170, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210204
    摘要:
    微生物在酸胁迫下的耐受能力对于菌株的生长和工业化生产均具有重要意义。当细菌细胞面临外界酸性环境压力时,周质空间蛋白质相对胞内蛋白受到更大酸性压力,所受酸性伤害也比胞内蛋白质更为严重。在革兰阴性菌耐酸过程中,除了胞内的脱羧酶系统外,分子伴侣作为一种重要的“纠错”机制可参与识别并保护蛋白质的空间结构。本文介绍了HdeA、HdeB、DnaK和GroEL等分子伴侣在功能、结构、耐酸机制以及应用前景等方面的研究现状,阐述了分子伴侣介导的耐酸机制的调控方式。深入探究和解析分子伴侣对酸胁迫环境的生理适应策略,以期利用这些研究对目的菌株进行生理性能改造,提高菌株在酸性胁迫环境下的存活能力和耐受性,对工业化发酵、临床抗菌治疗靶点的发现等具有重要意义。
    论文
    2021,52(2):171-176, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210205
    摘要:
    以丁香醛(1)为原料,通过乙酰化保护羟基、醛基还原、氯代、与三苯基膦反应合成膦叶立德中间体(5),并在此基础上通过Wittig反应、脱乙酰基和双键还原反应,合成杓唇石斛素(moscatilin,MST)及其12个类似物(MST-1 ~ MST-12),结构经1H NMR、13C NMR和ESI-MS表征。采用细菌脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型对目标化合物进行初步体外抗炎活性测试,结果表明:所有化合物均能不同程度抑制炎症因子NO的生成,其中MST-5的抗炎活性最强(IC50 = 0.428 μmol/L),MST-5有待进一步研究其抗炎机制。
    2021,52(2):177-185, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210206
    摘要:
    采用大孔吸附树脂、正、反相硅胶、Sephadex LH-20等多种柱色谱方法和制备高效液相色谱法对鸡血藤属植物丰城鸡血藤Callerya nitita Benth.var.hirsutissima.Z.Wei.藤茎70%乙醇提取物的石油醚和正丁醇萃取部位化学成分进行分离,并根据化合物的理化性质、波谱数据对化合物的结构进行鉴定。从两个萃取部位共分离鉴定了1个三萜类化合物和20个黄酮类化合物,即蒲公英赛酮(1)、槐角苷(2)、saikoisoflavonoside A(3)、鹰嘴豆芽素A 7-O-β-D-呋喃芹菜糖基-(1→5)-β-D-呋喃芹菜糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、刺芒柄花素-7-O-β-D-吡喃半乳糖苷(5)、3′-O-甲基红车轴草素(6)、鹰嘴豆芽素A 7-O-β-D-呋喃芹菜糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、槐属双苷(8)、黄甘草苷(9)、4′-羟基-3′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-呋喃芹菜糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、樱黄素(11)、樱黄素4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、红车轴草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)、8-甲氧基异刺芒柄花素(14)、染料木素(15)、红车轴草素(16)、鹰嘴豆芽素A(17)、5,7-二羟基-3′,5′-二甲氧基异黄酮(18)、芒柄花苷(19)、异芒柄花素(20)、木犀草素(21)。其中化合物1 ~ 10、12 ~ 14、16 ~ 18、20为该植物中首次分离得到。
    2021,52(2):186-194, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210207
    摘要:
    构建载铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA) DNA疫苗的PLGA-PEG-PLGA温敏水凝胶系统,评价该系统的体内免疫效力。通过简单物理混合法制备PA DNA疫苗的PLGA-PEG-PLGA温敏水凝胶,测量其胶凝温度;评价其体外毒性、体外累计释放率;通过凝胶体积变化评价水凝胶的体内降解;将小鼠分为对照组(PBS)、水凝胶组(Hydrogel)、in vivo-jetPEI/质粒DNA组(in vivo-jetPEI/pDNA)、水凝胶+in vivo-jetPEI/质粒DNA组(Gel+in vivo-jetPEI/pDNA),免疫3次,每次间隔10 d,末次免疫2周后处死小鼠,检测血清特异性IgG抗体、脾淋巴细胞增殖情况及细胞上清液中IFN-γ水平。结果显示,PLGA-PEG-PLGA水凝胶具有温敏性,相变温度为(32 ± 0.5) ℃;体外对DC 2.4细胞无明显毒性;体外释放7 d时约释放80%的质粒DNA;PLGA-PEG-PLGA在体内具有可降解性,大约15 d几乎完全降解;体内免疫实验表明in vivo-jetPEI/pDNA及Gel+in vivo-jetPEI/pDNA组小鼠脾淋巴细胞明显增殖、特异性IgG抗体及IFN-γ水平升高,且水凝胶可增强DNA疫苗诱导的免疫反应水平。结果表明,载PA DNA疫苗的温敏水凝胶系统是研发PA疫苗有前景的一种新策略。
    2021,52(2):195-202, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210208
    摘要:
    基于非洛地平低溶解、高渗透的典型生物药剂学分类系统(BCS) Ⅱ类药性质,考察不同增溶策略对其口服吸收的影响。首先,制备原料药粒径为(200、150、25 μm)的非洛地平普通片;同时采用增溶手段制备非洛地平固体分散体和平均粒径(168.90 ± 6.22)nm,多分散指数PDI 0.11 ± 0.06的非洛地平纳米混悬剂。考察上述不同非洛地平制剂在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率、表观渗透系数Papp、累积吸收量及体内药代动力学特性。大鼠在体单向肠灌流结果表明,不同制剂的非洛地平在十二指肠、空肠、回肠的吸收均优于结肠,非洛地平在小肠有广泛的吸收窗,最佳吸收部位在小肠,且不同制剂的非洛地平Papp均大于2.0 × 10-5 cm/s,低溶解性是限制其吸收的主要因素。体内药代动力学实验表明,增溶策略可显著提高生物利用度,原料药粒径为150 μm和25 μm的非洛地平普通片、纳米混悬剂、固体分散体生物利用度分别为原料药粒径为200 μm的非洛地平普通片的138.75%、173.01%、208.65%和314.53%。增溶策略可显著提高非洛地平胃肠道吸收速率和吸收量,从而提高生物利用度,为BCS Ⅱ类药提高口服吸收效果提供理论参考。
    2021,52(2):203-210, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210209
    摘要:
    研究不同相对分子质量透明质酸(HA)对还原型谷胱甘肽(GSH)在SD大鼠离体皮肤中透皮吸收和储留能力的影响。采用Franz扩散池法考察了不同相对分子质量HA对GSH的体外经皮渗透量及在不同层次皮肤中储留量的影响;利用分子对接AutoDock研究了GSH与HA的相互作用;采用全反射傅里叶红外变换光谱(ATR-FTIR)和H&E切片染色表征HA作用于皮肤后,大鼠角质层中脂质和蛋白的变化及影响。离体透皮实验结果表明,不同相对分子质量的HA对GSH透过皮肤的药量有显著影响,且随着HA的相对分子质量增加,阻碍GSH透过皮肤的作用越强;而在皮肤储留方面,不同相对分子质量的HA均能增加GSH在角质层中的储留量,7 000以下相对分子质量的HA还能显著增加GSH在真皮层中的储留。分子对接结果表明,HA与GSH具有较为强烈的相互作用,可以形成分子间氢键;而ATR-FTIR和HE染色结果则表明,HA可以与皮肤角质层中的脂质与角蛋白发生作用。这种相互作用增加药物的角质层渗透能力,但是作为水溶性的GSH,可能其可以与HA形成分子间氢键的缘故,被网罗在HA水凝胶结构中,从而导致GSH透过完整皮肤的药物量降低;但同时这种相互作用也提供了形成GSH的储库作用,增加了其在皮肤中的储留。通过不同相对分子质量的HA的增加GSH在离体皮肤角质层和真皮层中的储留量的比较,结果显示,低相对分子质量的HA储留能力最好。
    2021,52(2):211-218, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210210
    摘要:
    通过纳米晶技术将难溶性药物姜黄素制备成方便给药的口服纳米晶固体制剂,以提高姜黄素的溶解度及溶出速率,进而提高生物利用度。采用介质研磨法制备姜黄素纳米晶混悬液,得到两种稳定的姜黄素纳米晶混悬液处方,稳定剂分别为聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)/十二烷基硫酸钠(SDS)(1∶1),以及吐温80;通过流化床底喷包衣工艺将姜黄素纳米晶负载于丸芯上得到载药微丸,灌装后得到纳米晶胶囊。纳米晶再分散稳定性实验和扫描电镜(SEM)实验结果表明,以PVP K30/SDS为稳定剂时载药微丸形态均一且再分散前后纳米晶粒径均在200 nm左右,为最优处方。体外溶出研究表明,粒径为200 nm时显著提高了溶出速率和溶出度;X射线粉末衍射(XRPD)和差示扫描量热(DSC)分析结果表明,纳米晶制备过程中少部分晶型转变为无定型;大鼠体内药代动力学研究显示,姜黄素制成纳米晶后生物利用度达到原料药的9.3倍。本研究开发的姜黄素纳米晶胶囊可显著提高药物的体外溶出速率和溶出度、体内吸收速度和生物利用度,在改善药物难溶性方面具有重要意义。
    2021,52(2):219-226, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210211
    摘要:
    大多数哺乳动物中枢神经系统疾病发生后神经细胞轴突受到损伤,由于受损的神经细胞促进轴突再生的能力有限,同时胶质疤痕的生成以及抑制性营养因子的释放,导致受损神经细胞轴突难以再生。为研究注射用脑蛋白水解物(Ⅱ)[cerebroprotein hydrolysate for injection (II),CBL]对神经细胞轴突再生的影响及其潜在的分子机制,采用免疫荧光染色检测小鼠脑神经瘤细胞(Neuro-2a)和小鼠原代皮层神经细胞的轴突长度;通过蛋白免疫印迹法检测Neuro-2a细胞和小鼠原代皮层神经细胞内磷酸化TrkB蛋白的表达水平。结果显示:CBL可以促进Neuro-2a细胞和小鼠原代皮层神经细胞的轴突再生,上调神经细胞内TrkB的磷酸化水平;5 μg/mL的CBL作用于神经细胞1 h,可以显著升高神经细胞内TrkB磷酸化水平。研究结果表明:CBL可以促进神经细胞轴突再生以及升高TrkB磷酸化水平,提示CBL促进神经细胞轴突再生的作用可能与激活TrkB信号通路有关。
    2021,52(2):227-235, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210212
    摘要:
    观察马赛替尼对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、马赛替尼低、中、高剂量治疗组,每组12只。线栓法制备大鼠大脑中动脉梗阻2 h后复灌模型,即刻给药,每天给药两次,连续7 d。再灌注7 d后行神经功能症状缺损评分,检测脑梗死体积及脑含水量,Western blot和PCR检测损伤周围脑组织自噬和凋亡相关蛋白和基因的表达。术后7 d,与模型组相比,各给药组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积和脑积水均明显降低。模型组大鼠脑组织中明显上升,p62的表达明显下降。马赛替尼各组均能不同程度地下调LC3II/I、Beclin-1、Bax等凋亡蛋白和NF-κB的表达,上调p62的表达。马赛替尼发挥神经保护作用的机制之一可能与抑制自噬和细胞凋亡通路有关。
    2021,52(2):236-244, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210213
    摘要:
    采用重叠PCR(overlap PCR)方法构建了pdr5snq2基因敲除组件,研究了pdr5snq2基因突变对酵母细胞传感器评估遗传毒性的影响。考察了野生型、pdr5单基因突变、snq2单基因突变与pdr5snq2双基因突变酵母细胞传感器暴露于系列浓度甲磺酸甲酯(MMS)、甲磺酸乙酯(EMS)、顺铂、4-硝基喹啉-N-氧化物(4NOQ)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基脲、水杨酸和葡萄糖溶液24 h后的细胞生长抑制情况与16 h后的荧光诱导情况。研究结果表明,overlap PCR方法能够高效率构建基因突变酵母细胞传感器;snq2单基因突变与pdr5snq2双基因突变细胞传感器检测遗传毒性的准确度为100%,高于野生型与pdr5单基因突变细胞传感器(87.5%);pdr5snq2双基因突变酵母细胞传感器表现出最高的遗传毒性检测灵敏度,为构建高准确度与灵敏度的酵母细胞传感器提供了思路与方法,为酵母细胞膜转运蛋白基因pdr5snq2的进一步功能研究奠定了基础。
    综述
    2021,52(2):245-252, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210214
    摘要:
    载药脂质体已经成为改善药物体内行为或实现靶向给药的重要新剂型,对其关键工艺过程和相应的关键质量属性进行研究和控制是载药脂质体研究的重要工作。包封程度的高低直接决定药物在体内的疗效,因此,包封率是脂质体的关键质量属性之一。本文对常用的包封率测定方法及其特点进行分析与比较,探讨了包封率测定时需考虑的主要因素,为载药脂质体剂型开发提供参考。
    2021,52(2):253-260, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20210215
    摘要:
    骨关节炎(OA)是一种常见的慢性关节疾病,主要的病理改变为关节软骨的退化和继发性骨质增生。现有的药物治疗方式存在明显的局限性,仅从镇痛角度治疗或行关节置换术,二者均不能从根本上改善关节软骨的病变。因此,抑制OA疾病进展的药物(DMOAD)应运而生。DMOAD通过参与调节软骨代谢平衡、参与软骨下骨重塑和控制局部炎症等机制从根本上抑制关节软骨结构性退变,从而使OA患者得到疼痛及功能的症状改善,延缓做人工关节置换术的时间,提高患者生活质量。目前全球范围内尚无DMOAD类药物上市,本文从DMOAD药物的研发背景、作用机制以及各类机制下在研代表药物的研发进展进行综述,为今后的研究提供参考。
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    Available online:2021-06-09, DOI:
    摘要:
    皮肤外用制剂包括软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、贴剂、贴膏剂等,为临床上的常用剂型之一,可避免首过效应,使用方便。流变学可描述产品的流动特性和力学性能,反映制剂的内部结构,已成为皮肤外用制剂的重要研究内容。流变学研究通常分为稳态流变学和动态流变学两种,用于研究样品的液体行为和固体行为。本文综述了研究这两种流变学方法的内容及常用的数据分析模型,以期为皮肤外用制剂的流变学研究提供参考。
    Available online:2021-06-03, DOI:
    摘要:
    胰腺癌基质在肿瘤进展、侵袭、转移和治疗抵抗中扮演着重要角色,单纯的靶向肿瘤细胞治疗策略已无法满足延长患者生存期的临床治疗需求。越来越多的研究着眼于靶向胰腺癌基质治疗与化疗、放疗和免疫疗法联合用药方案的开发。胰腺癌复杂的基质成分、互相串扰的信号通路和畸形增生的新生血管给靶向药物的研究开发带来了巨大挑战的同时也提供了相应的机遇。本文主要从细胞外基质(extracellular matrix, ECM)、肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts, CAFs)和血管三个方面,综述了近期靶向胰腺癌基质治疗策略研究进展并加以分析讨论,以期为胰腺癌的靶向治疗提供新思路。
    Available online:2021-06-01, DOI:
    摘要:
    目的 建立快速检测毛发中地佐辛和杜冷丁含量的超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法。方法 将清洗后的毛发样品经甲醇研磨超声提取后进行UPLC-MS/MS分析。色谱柱为Waters ACQUITY BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相为0.1%甲酸水-甲醇,0.4 mL/min梯度洗脱。质谱采用ESI+离子源,MRM多反应监测,测定地佐辛和杜冷丁的定性离子对和定量离子对。结果 地佐辛和杜冷丁在0.01~8 ng/mg范围内线性关系良好,检出限均为0.005 ng/mg,定量限均为0.01 ng/mg;准确度和精密度、基质效应和提取回收率以及稳定性均符合方法学要求。结论 本文建立的方法可简单、快速、准确地测定毛发中地佐辛和杜冷丁的含量,可应用于地佐辛和杜冷丁滥用的相关案件分析。
    Available online:2021-05-31, DOI:
    摘要:
    异源表达鲍曼不动杆菌AB0057的UDP-葡萄糖4-差向异构酶并表征其酶学性质以及分析其结构与功能。将异构酶基因构建到pET-28a表达载体并在大肠埃希菌BL21(DE3)中异源表达,使用高效液相色谱检测酶活力及表征酶学性质。系统发育分析、序列比对、同源建模与分子对接分析其结构与关键催化位点。结果显示,重组酶Gne1获得可溶性表达,质量约为38.9 kDa, 催化最适温度为44 ℃,最适pH为6.0,米氏常数KM与催化常数kcat分别为(1.227±0.0824) mmol/L和(82.64±3.562) 10-3·min-1。该酶属于NADB_Rossmann超家族并分属于UDP_G4E_1_SDR_e亚组,分别具有典型GXGXXG基序与YXXXK基序。N端结构域与NAD结合,而C端结构域用来结合底物,催化关键位点为S125和Y150。本研究验证了Gne1的差向异构酶活性,阐释了其序列特点和结构特征,揭示了其与底物、辅因子的结合模式,分析了关键催化位点。为蛋白质工程改造提高酶活力进而利用生物酶法合成稀有功能糖提供了依据。
    Available online:2021-05-31, DOI:
    摘要:
    多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARPs)利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)为底物,将单个或链状的ADP核糖转移到自身或其他靶蛋白上,从而调控各种细胞反应。其中,催化单个ADP-核糖的为单-ADP核糖转移酶(MARTs)。与PARP1/2类似,大部分MARTs在癌症中过度表达。一些包括PARP7、PARP9、PARP10、PARP14在内的MARTs被证明与癌症的发生发展密切相关,他们可能成为检测与治疗这些癌症的潜在靶点。本文将重点介绍在癌症中过度表达的MARTs,对其在癌症治疗中的潜在价值及抑制剂的研究进展进行综述。
    Available online:2021-05-28, DOI:
    摘要:
    研究灵芝孢子糖肽对小鼠肝损伤的保护作用。分别建立四氯化碳(CCl4)、乙醇致小鼠急性、慢性肝损伤,灌胃给予灵芝孢子糖肽65 mg/kg、130 mg/kg、260 mg/kg,测定小鼠肝指数,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),Elisa法检测肝组织炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量,H E染色观察肝组织病理损伤。结果表明,灵芝孢子糖肽可显著降低急性、慢性肝损伤小鼠肝指数、血清AST和ALT含量。在CCl4致慢性肝损伤模型中,灵芝孢子糖肽显著降低小鼠肝组织IL-6、TNF-α及iNOS的含量,改善肝组织病理损伤。上述结果表明灵芝孢子糖肽可以显著减轻小鼠急、慢性肝损伤,并且具有一定的抗炎活性。
    Available online:2021-05-27, DOI:
    摘要:
    为了研究PM2.5混悬液对博来霉素(BLM)诱导的肺纤维化小鼠的影响以及新对叶百部碱(NTS)的干预作用,本实验采用析因实验设计研究了PM2.5混悬液给药次数(每周1次或2次)和BLM剂量(1.5、3.0 U/kg)对小鼠肺纤维化模型的影响。小鼠于第0天经气管滴注1.5或3.0 U/kg的BLM;从第1天开始,小鼠每周1次或2次气管滴注5 mg/kg的PM2.5混悬液;从第8天开始,给药组小鼠每天1次灌胃给予30 mg/kg的NTS直至21d;21 d后观察肺组织病理切片的苏木精-伊红(H-E)染色和Masson染色结果,计算小鼠肺系数、肺组织羟脯胺酸(HYP)含量和基于病理切片的H-E炎性评分和胶原容积分数(CVF)。结果显示,对于单独滴注PM2.5混悬液的小鼠,每周1次时只有H-E炎性评分显著升高,每周2次时HYP和H-E炎性评分增加但CVF值无显著升高;而PM2.5与BLM联合滴注的各组小鼠的CVF值均显著增加;新对叶百部碱能够显著改善联合滴注小鼠的肺组织病理改变、减少胶原沉积,降低小鼠的CVF值和α-SMA蛋白的表达,具有抑制肺纤维化的作用。本研究结果表明,单独滴注PM2.5主要引起肺部炎症,即使多次给药引起肺纤维化的可能性也较小;但PM2.5与BLM联合滴注则小鼠肺组织胶原沉积显著增加,大大加重了BLM引起的肺纤维化,提示PM2.5对有呼吸系统疾病或基础性疾病的患者影响很大,而新对叶百部碱对联合滴注模型小鼠的肺纤维化具有明显的改善作用。
    Available online:2021-05-27, DOI:
    摘要:
    基于LC-Q-TOF/MS技术探究水杨酸钠对小鼠HEI-OC1毛细胞样细胞中内源性代谢的影响。首先用不同浓度的水杨酸钠处理HEI-OC1细胞,使用CCK-8法检测细胞存活率的变化。然后通过水杨酸钠给药不同时间,观察细胞形态的变化,并利用代谢组学技术进行研究,筛选组间差异代谢产物,分析相关的代谢通路。结果表明,水杨酸钠能够显著抑制HEI-OC1细胞的存活率,且随着浓度的增加,抑制作用越强。同时水杨酸钠会会使细胞形态拉长,并在撤药后恢复正常。水杨酸钠处理HEI-OC1细胞后共筛选出乳清酸、尿苷、天冬氨酸等18种差异代谢物,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢,嘧啶代谢这2条可能的代谢通路。综上所述,通过应用代谢组学技术从微观角度去评价水杨酸钠对HEI-OC1细胞的作用,可为水杨酸钠耳毒性及耳鸣的发生发展研究提供新思路。
    Available online:2021-05-26, DOI:
    摘要:
    近年来,靶向细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)等免疫检查调控点的抗体药物已应用于临床多种癌症的治疗方案。CXC趋化因子受体4型(CXCR4)也是一种已被验证的治疗靶点,在胰腺导管腺癌(PDAC)等多种癌症中过度表达,与肿瘤的生长浸润转移密切相关。本研究针对PD-L1和CXCR4两个靶点,设计双特异性纳米抗体anti-PD-L1&CXCR4 的基因序列,C末端连接组氨酸标签(6×His-tag),通过pET-22b(+)重组表达质粒转化大肠埃希菌 E.coli BL21,经 IPTG 诱导表达,以可溶性形式存在于菌体裂解上清液。为了提高双特异性纳米抗体的产量和纯度,采用三种不同的方法进行样品制备和纯化。结果表明,通过机械裂菌并改进缓冲液的盐离子和咪唑浓度以及pH,经His Trap FF亲和色谱柱纯化后,对双特异性纳米抗体分离效果较好,目的蛋白产量超过1 mg/L,纯度可达到97 %。同时,anti-PD-L1&CXCR4双特异性纳米抗体能够与细胞表面两个抗原特异性结合,增强IL-2活化的人外周血单个核细胞(PBMC)对胰腺癌细胞株 AsPC-1的杀伤能力,为后续体内药效学评价奠定了基础。
    Available online:2021-05-25, DOI:
    摘要:
    探讨芒柄花素-3′-磺酸钠对小鼠胶原性类风湿关节炎的治疗作用及机制。用鸡II型胶原诱导C57小鼠,建立类风湿关节炎模型(Collagen-induced arthritis,CIA),腹腔注射不同剂量的芒柄花素-3′-磺酸钠(50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg),治疗前后观察所有组小鼠体质量、食物摄入量和足肿胀情况。实验结束后,CBA试剂盒检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10的水平,蛋白质印迹法测定脾脏组织中NF-κB p65、NF-κB p-p65、TIPE2、PCNP、IκB-α的表达水平,同时观察小鼠的脏器指数、踝关节软骨组织的病理变化及踝关节组织中NF-κB p65阳性表达情况。结果表明,与模型对照组比较,给药组小鼠体质量及食物摄入量有所升高,足肿胀程度降低;血清中炎症因子TNF-α、IL-6表达水平降低,抑炎因子IL-10表达上升;脾组织中NF-κB p65、NF-κB p-p65、PCNP蛋白表达降低,而TIPE2、IκB-α蛋白表达上升;给药组CIA小鼠的脾和胸腺指数降低,踝关节中炎细胞浸润减少、滑膜组织及软骨破坏程度减轻,NF-κB p65阳性表达水平下降;其中芒柄花素-3′-磺酸钠高剂量组显示出更好的治疗效果。提示芒柄花素-3′-磺酸钠对CIA小鼠具有治疗作用,其作用机制可能是通过调控NF-κB p65信号通路,抑制炎症因子水平表达来实现的。
    Available online:2021-05-21, DOI:
    摘要:
    光动力治疗是一种新型非侵入性治疗手段,其原理是光敏剂经激光触发后将能量转移至氧气,生成具有细胞毒性的单线态氧,从而诱导肿瘤细胞发生凋亡或坏死。作为一种氧依赖性的治疗方式,光动力治疗的抗肿瘤效果明显受限于实体瘤的乏氧微环境。因此,逆转并改善肿瘤组织的缺氧情况可显著增强光动力治疗效果。本文重点讨论纳米递送系统介导的肿瘤增氧策略的研究进展,包括氧气直接递送策略、酶催化产氧递送策略、响应型材料原位产氧递送策略和微生物体供氧递送策略,以提高光动力治疗抗肿瘤效果,为进一步研究增氧型光动力治疗纳米给药系统提供了新思路和新方案。
    Available online:2021-05-21, DOI:
    摘要:
    摘 要: 从一株植物内生漆斑菌属Myrothecium sp.真菌固体发酵物的乙酸乙酯提取物中分离得到12个化合物。采用硅胶、Sephadex LH-20和制备高效液相等柱色谱进行分离纯化,通过理化性质研究及波谱学手段对单体化合物进行结构鉴定,分别鉴定为3'-羟基疣孢菌素A (1)、疣孢菌素A (2)、乙酰基疣孢菌素 L (3)、疣孢菌素J (4)、疣孢菌素K (5)、漆斑菌素A (6)、漆斑菌素D (7)、漆斑菌素H (8)、漆斑菌素J (9)、Verrol 4-acetate (10)、dihydrosporothrioride (11) 和4, 6-二羟基-1(3H) -异苯并呋喃 (12)。其中,化合物1、5、9~12为首次从漆斑菌属真菌中分离得到,化合物2、3、4、7和8对白色念珠菌有较强的抑制作用,MIC50值分别是0.318、0.218、0.047、0.569和0.558 μg/mL。
    Available online:2021-05-20, DOI:
    摘要:
    探讨基于谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的口服疫苗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1D)模型小鼠的治疗作用。采用小剂量多次腹腔注射STZ建立T1D模型。使用溶剂扩散法制备融合蛋白CTB-GADIII与海藻酸钙纳米疫苗:Ca-Alg-GADIII,口服灌胃T1D小鼠,一周1次,连续5周,每周记录小鼠血糖体质量。通过糖耐量测定(OGTT)和胰腺组织病理分析研究口服疫苗抗T1D药效学。通过ELISA检测血清中自身抗体(GADA、IAA)、相关细胞因子(IL-4、IFN-γ、TGF-β1)的含量,流式检测CD4+T细胞分型情况,对口服疫苗抗T1D作用的免疫学机制进行初步探讨。结果显示,疫苗免疫后的小鼠空腹血糖有一定的改善,糖耐量提高,胰腺损伤减少,胰岛素分泌增加,GADA及IAA滴度的显著下降,MLN和PLN中CD4+T细胞免疫平衡有一定的改善。实验结果表明Ca-Alg-GADIII口服疫苗对STZ诱导的T1D小鼠具有一定的治疗作用。
    Available online:2021-05-19, DOI:
    摘要:
    过继性细胞免疫疗法近年来因取得显著效果而得到广泛认可,尤其是CD19特异嵌合抗原受体(CAR)的自体T细胞治疗恶性血液瘤的成功。本文总结了实体瘤存在免疫抑制的机制包括肿瘤免疫微环境的存在、肿瘤靶点不均一,免疫抑制性受体的存在等。总结了选择肿瘤特异性抗原、提高T细胞的浸润与归巢等各种策略来对抗实体瘤的免疫抑制微环境,从而增强T细胞的细胞毒性和促进肿瘤细胞的消除。为后续CAR-T治疗实体瘤的研究奠定理论基础。
    Available online:2021-05-19, DOI:
    摘要:
    B7-H3是在多种肿瘤表面过表达的免疫检查点分子,是肿瘤免疫治疗的理想靶点。本文利用实验室前期设计的硝基化T细胞表位,构建可靶向免疫检查点B7-H3的表位疫苗。该疫苗能在CT26结肠癌模型中显著抑制肿瘤生长,且与PD-L1蛋白疫苗有明显的协同作用。B7-H3疫苗可以增加脾脏T淋巴细胞中CD4+T细胞的比例和肿瘤浸润T淋巴细胞中CD8+T细胞的比例,同时减少肿瘤浸润CD4+T淋巴细胞中抑制性Treg细胞的比例,有效改善肿瘤免疫抑制微环境。研究结果提示,B7-H3表位疫苗可以作为有效的肿瘤疫苗候选分子。
    Available online:2021-05-18, DOI:
    摘要:
    探讨补骨脂素(Psoralen,PSO)对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的改善作用及其机制研究。雌性C57BL/6小鼠连续灌胃补骨脂素或阳性对照药烯丙基化硫 (Diallyl sulfide,DAS) 4天,第4天腹腔注射四氯化碳,建立四氯化碳急性肝损伤模型。检测血清生化指标丙氨酸转氨酶 (ALT) 、天冬氨酸转氨酶 (AST) 水平;HE染色观察肝脏病理学改变;Western blot检测细胞色素P450 2E1 (CYP2E1) 的蛋白水平;免疫组织化学染色检测CYP2E1的蛋白水平;RT-PCR检测CYP2E1以及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的基因水平。与模型组相比,补骨脂素能够改善四氯化碳引起的炎性细胞浸润以及肝细胞坏死情况,显著降低血清ALT、AST水平,下调炎症因子TNF-α和IL-6的水平,抑制CYP2E1的蛋白表达。结果表明,补骨脂素对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤具有改善作用,其机制可能是通过抑制CYP2E1的蛋白表达发挥药效作用。
    Available online:2021-05-12, DOI:
    摘要:
    研究合成叶酸偶联物,并将其应用于叶酸靶向脂质体制备,考察其在体外肝癌HepG2细胞中的靶向性。通过酰胺反应将叶酸、胆固醇琥珀酸单酯与两种不同分子量的聚氧乙烯二胺材料连接,合成两种两亲性的叶酸-聚乙二醇-胆固醇琥珀酸单酯(Folate-PEG2000-CHEMS和Folate-PEG4000-CHEMS),并利用核磁共振氢谱(1H NMR)和超高分辨率复杂体分离鉴定质谱系统对其进行了结构表征。选取钙黄绿素为模型药物,采用薄膜分散法分别利用Folate-PEG2000-CHEMS和Folate-PEG4000-CHEMS制备了钙黄绿素脂质体FA-PEG2000-L与FA-PEG4000-L。利用激光粒度仪检测FA-PEG2000-L与FA-PEG4000-L的粒径、Zeta电位;利用流式细胞仪和激光共聚焦扫描显微镜,考察了脂质体FA-PEG2000-L与FA-PEG4000-L在HepG2细胞体外摄取实验中的药物递送效果。结果显示,钙黄绿素脂质体的平均粒径为(205.8±10.2)nm,经电位测试脂质体的 Zeta电位值为(?1.19±0.31)mV。FA-PEG4000-L靶向脂质体的荧光强度值分别约为普通脂质体、FA-PEG2000-L的3.6倍、3.1倍(P < 0.01),FA-PEG4000-L在HepG2细胞中的递送效率明显高于FA-PEG2000-L与非靶向组,说明Folate-PEG4000-CHEMS可应用于脂质体制备,并可促进体外HepG2细胞对脂质体的摄取。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    本研究以A环1, 2-亚甲二氧基为取代,合成了一系列在D环9, 10, 11位含不同取代基的共10个阿朴菲类生物碱,其结构均经 ESI-MS、13C-NMR和1 H NMR确认。通过MTT实验探究此类化合物对B16F10黑色瘤细胞潜在的抗肿瘤活性,并进一步分析其构效关系,同时采用斑马鱼体内急性毒性实验对活性化合物进行安全性评价。结果表明部分化合物对肿瘤细胞具有较强的抑制活性,可以显著抑制B16F10黑色素瘤细胞的增殖,其中化合物IVa的抗黑色素瘤活性最佳且安全范围大,可作为抗B16F10黑色素瘤细胞增殖的先导化合物进一步研究。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    改进阿普斯特合成中的氢化还原反应工艺。以3-硝基邻苯二甲酸酐(SM1)和(S)- [1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲磺酰基)乙胺] ·N-乙酰基-L-亮氨酸盐(SM2)为起始原料,经过胺化反应得到(S)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-硝基异吲哚啉-1,3-二酮(APST-1),再以甲酸铵作为氢源,氢氧化钯碳为催化剂,将APST-1还原成(S)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-氨基异吲哚啉-1,3-二酮(APST-2),最后与醋酐完成乙酰化反应得到阿普斯特(APST)。目标产物结构经比旋度、1H-NMR、13C-NMR、MS和元素分析等确证,胺化、还原和乙酰化三步反应总收率提高至67.0%。改进后的还原工艺,避开了氢化加压特种反应,降低了安全风险和生产成本,具有较高的商业化价值。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    探究血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid A, SAA)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)模型小鼠的认知功能及tau蛋白磷酸化水平的影响。构建Saa3缺失的APP/PS1转基因AD小鼠模型和侧脑室注射链脲菌素(ICV-STZ)AD小鼠模型。采用免疫荧光方法检测两种AD模型小鼠脑内Saa3的表达。记录ICV-STZ小鼠造模期间的体重变化。采用转棒式疲劳仪、旷场实验和高架十字迷宫分别检测小鼠运动协调和平衡能力、自主运动能力和焦虑程度。Morris水迷宫实验评估小鼠的空间学习和记忆能力。Western blot实验检测小鼠脑组织中tau蛋白的磷酸化水平。结果发现,两种AD模型小鼠脑内Saa3的表达显著增加。Saa3缺失对两种AD模型小鼠的运动协调和平衡能力及自主运动能力无显著影响。Saa3缺失缓解了AD小鼠的焦虑程度。Saa3缺失改善了ICV-STZ模型小鼠的学习和记忆能力损伤。Saa3缺失降低了AD小鼠脑内tau蛋白特定位点的磷酸化水平。组间差异有统计学意义(P<0.05)。这些结果表明,Saa3参与AD的认知功能和tau蛋白的病理进展,抑制SAA为AD的治疗和预防提供了新策略。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    Nod样受体蛋白(Nod-like receptor protein 3, NLRP3)炎性小体可识别多种病原体及细胞损伤,诱导分泌炎症因子IL-1b、IL-18,调节炎症反应,是固有免疫系统的重要组分。近年研究表明,钙离子(Ca2+)信号参与多种NLRP3激动剂诱导的NLRP3激活过程,并与相关疾病的发生密切相关。本文综述了有关钙离子与NLRP3炎性小体的文献,重点关注钙离子信号在NLRP3炎症小体激活和调节中的潜在作用。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    制备吸入用瑞德西韦脂质体并对其体外性质进行评价。首先对瑞德西韦脂质体制备方法进行考察,通过单因素实验确定了制剂的处方组成和制备工艺。然后对瑞德西韦脂质体吸入剂的基本性质、体外沉积性质和空气动力学粒径等进行了全面评价。结果显示,以薄膜分散法制备并以pH 6.5磷酸盐缓冲液为水化介质制得的脂质体其粒径较小、包封率高、48 h几乎无沉淀产生。优化后的处方中药物与二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)的比例为1:20,胆固醇占总脂材的10%,并加入20% 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-mPEG 2000)以提高脂质体稳定性。在冷冻干燥过程中加入4%海藻糖作为冻干保护剂,得到的冻干剂具有理想的外观并且复溶前后粒径变化较小、稳定性良好。透射电镜下观察到脂质体的微观形态呈表面光滑的球状结构,且粒径分布均匀。体外释放显示经雾化器雾化前后脂质体混悬液的释放曲线无明显改变;体外沉积性质考察表明,使用新一代撞击器测得的细颗粒占51.4%,质量中值空气动力学粒径小于5 μm。综上所述,吸入用瑞德西韦脂质体具有良好的包封率和稳定性,雾化后的脂质体混悬液粒度分布适宜,能够有效地在肺部沉积,为新型冠状肺炎的治疗提供了新的思路。
    Available online:2021-05-11, DOI:
    摘要:
    建立一种基于液液萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(LLE-UPLC-MS/MS)同时测定污水中10种毒品的氘代内标定量分析方法。污水样品经二氯甲烷-乙酸乙酯(1:1,v:v)液液萃取浓缩,采用C18色谱柱0.1%甲酸-5mM甲酸铵水溶液和乙腈线性梯度洗脱分离, ESI正离子化多反应监测进行定量分析。10种待测物在各自的标准曲线范围内线性关系良好(r≥0.9957),定量限为1 ng/L(除苯丙胺为2.5 ng/L),相对回收率范围为96.36~106.43%,日内与日间精密度均小于4.70%。该方法准确可靠、重现性好,适用于污水中10种毒品的定量检测,对影响固相萃取富集的复杂基质污水同样适用,为实时监测药品滥用提供了新的分析手段。
    Available online:2021-05-10, DOI:
    摘要:
    摘 要 探究9次跨膜超家族蛋白2(Transmembrane 9 superfamily protein member 2, TM9SF2)对于三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和转移的影响及其分子机制。用国际乳腺癌协会的分子分类数据库(Metabric)分析 TM9SF2 mRNA的表达水平在癌旁和癌的区别;采用Western blotting 检测三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231和非致瘤的乳腺上皮细胞株 MCF-10A 中TM9SF2蛋白表达的情况;对高表达TM9SF2的三阴性细胞株MDA-MB-231进行基因沉默;采用MTS法检测细胞增殖活性,采用Transwell实验和划痕实验检测细胞的转移能力;采用Western blotting检测细胞内增殖相关蛋白(PI3K、AKT、SRC和ERK)和转移相关蛋白(Snail、Slug 和 N-cadherin)的表达情况。数据库结果显示TM9SF2的mRNA水平在癌细胞中的表达量比在正常细胞中高,Western blotting证明MDA-MB-231中TM9SF2蛋白的表达量高于MCF-10A细胞。与对照组相比,siRNA-TM9SF2转染组TM9SF2蛋白表达下调,细胞增殖活性降低,细胞转移能力减弱,PI3K、Snail、Slug 和N-cadherin表达水平均降低,AKT蛋白磷酸化激活降低。研究结果表明TM9SF2基因能促进三阴型乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和转移。
    Available online:2021-05-10, DOI:
    摘要:
    肿瘤细胞通过代谢重编程满足其特殊的物质和能量需求。现有研究以糖代谢为主,氨基酸代谢在肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭方面也发挥了重要作用,是肿瘤能量代谢研究的新兴热点。半胱氨酸是一种生糖氨基酸,其代谢途径涉及多种酶和产物,可调节诸如氧化应激、能量代谢和细胞自噬等生理和病理过程。本文从肿瘤细胞中半胱氨酸的外源转运和内源性转化途径、半胱氨酸代谢途径对肿瘤发生发展的多种调控机理以及基于半胱氨酸代谢途径的潜在治疗靶点等方面进行了综述,为肿瘤临床用药提供理论依据。
    Available online:2021-05-10, DOI:
    摘要:
    本研究旨在考察关节腔注射塞来昔布PLGA微球对类风湿性关节炎的治疗作用。以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用O/W乳化溶剂挥发法制备塞来昔布微球(CEL-MS)。采用完全弗氏佐剂诱导佐剂型关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠模型,以大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、脾脏指数和关节滑膜组织病理学检查作为治疗效果的指标,考察关节腔注射CEL-MS对类风湿性关节炎的治疗作用。结果显示,微球的形态圆整、表面光滑,平均粒径为(1.3±0.1)μm、载药量为(20.8±0.6)%。体内药效试验结果显示,与塞来昔布混悬液口服和塞来昔布混悬液关节腔注射相比,在关节炎大鼠关节腔中注射CEL-MS可显著降低关节肿胀和关节炎指数,有效抑制滑膜炎症。以上结果表明,关节腔注射CEL-MS对类风湿性关节炎具有良好的治疗作用。
    Available online:2021-05-10, DOI:
    摘要:
    目前尚未有安全有效的基因递送系统成熟应用于原代树突细胞(Dendritic cell,DC)转染,因此,本文将针对原代DC构建基于脂质体的基因递送系统,并优化制备方法以提高原代DC的转染效率。本文将通过共孵育法、乙醇注入法、鱼精蛋白复合法分别制备含不同阳离子脂质的脂质体/siRNA复合物,并以粒径电位、对基因药物siRNA的包载能力、安全性、稳定性、DC的摄取效率和基因沉默效率为考察指标,评价并筛选出具有高转染效率的基因递送系统。与市售制剂Lipo2000相比,本文利用共孵育法制备的OA2递送系统的DC摄取效率提高约35%,基因沉默效率提高约10倍,且细胞存活率比Lipo2000提高20%,具有良好的DC基因转染效率和体外安全性。综上所述,本文为原代DC提供了一种安全有效、制备简单的基因递送载体平台,具有良好的应用前景。
    Available online:2021-05-07, DOI:
    摘要:
    基于串联质谱的蛋白质组学分析方法大部分依赖于实际谱图和理论谱图的匹配打分,而大量共洗脱肽的干扰会降低多肽和蛋白的鉴定及定量的准确性。由于多肽保留时间受肽序列的影响,因此保留时间与可作为多肽质谱数据的补充,改善多肽鉴定的准确性。复杂体系中多肽色谱保留预测也对优化蛋白质组学测定条件,提高数据非依赖采集中质谱数据的检出率和重复性具有重要意义。针对未修饰多肽及修饰多肽常用的色谱保留预测方法,包括基于标准化索引、多肽分子模型、氨基酸残基参数和机器学习等方法进行综述,总结各方法的原理、特点,并对他们在蛋白质组学中的应用及多肽色谱保留预测方法的发展方向进行了展望。
    Available online:2021-05-06, DOI:
    摘要:
    肿节风多糖SGP-2是前期研究中从肿节风全草中提取、分离纯化得到的一种酸性多糖。本文解析了SGP-2的高级结构,并对其不同高级结构特征与降血糖活性间的构效关系进行了讨论。采用激光粒度、透射电子显微镜(TEM)及原子力显微镜(AFM)技术对SGP-2在纯水及盐溶液中的高级结构进行了分析与比较。在纯水中SGP-2以聚集体及高分支球体两种构象存在,AFM分析得到SGP-2球体平均直径为33 nm,平均高度为1.84 nm。而在0.05 M Na2SO4溶液中SGP-2主要表现为具有高分支结构的紧密球体且粒径降低。对不同理化条件处理的SGP-2的高级结构进行了表征,并测定了各样品体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明SGP-2经0.5 M尿素处理并透析后的球体结构在1000 μg/mL浓度下抑制率可达原型SGP-2抑制率的98.8%;140oC加热后的SGP-2呈现分支杆状结构于1000 μg/mL浓度下抑制率高达83.3%,降糖活性高于同浓度下的原型SGP-2;而羧基还原后的样品呈缠结链结构,对于α-葡萄糖苷酶的抑制活性大大降低。本研究对SGP-2的高级结构进行了表征,并初步探讨了高级结构与降血糖活性之间的关系,为多糖药物的开发提供了理论依据。
    Available online:2021-04-30, DOI:
    摘要:
    随着肿瘤免疫疗法(cancer immunotherapy)的兴起,靶向免疫系统的小分子调节剂已成为研究热点,而免疫激酶作为一类研究较深入发展较成熟的靶点,受到越来越多的关注。 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相互作用激酶(MNKs)位于ERK和p38 MAPK信号通路的交汇点,可以在保守的丝氨酸209处特异性磷酸化真核翻译起始因子4E(eIF4E)并调节mRNA的翻译。MNKs信号通路在先天性和适应性免疫系统中起着重要作用,MNKs抑制剂在治疗肿瘤及免疫相关疾病的研究也越来越深入。本文就MNKs的结构特点、作用机制、信号转导途径及其与肿瘤的密切关系进行了综述,同时详细介绍了不同研究机构报道的MNKs抑制剂的发展过程和临床研究进展。
    Available online:2021-04-30, DOI:
    摘要:
    采用色谱-质谱联用技术鉴定劳拉西泮片中的有关物质。采用InertSustain C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸/20 mmol/L乙酸铵缓冲溶液为流动相梯度洗脱,对劳拉西泮片有关物质进行分离,电喷雾正离子化-四极杆-飞行时间串联质谱(ESI-Q-TOF/MS)高分辨测定各有关物质母离子及其子离子的准确质量和元素组成,通过光谱解析鉴定了它们的结构。在所建立的分析条件下,劳拉西泮及其有关物质分离良好,检测并鉴定出劳拉西泮片及其强制降解试验样品中22个含量大于0.1%的主要有关物质,其中5个为美国或欧洲药典规定的已知杂质,而其他均为本研究首次鉴定出的未知有关物质。色谱-质谱联用技术能有效地分离鉴定劳拉西泮片中的有关物质,可为其质量控制提供参考依据。
    Available online:2021-04-29, DOI:
    摘要:
    本文研究miR-23b对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)细胞模型的作用及机制。采用Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤建立细胞模型;采用Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞术检测转染miR-23b对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡情况的影响;采用JC-1探针检测转染miR-23b对Aβ25-35损伤SH-SY5Y细胞后细胞内线粒体膜电位的影响;采用western blot检测转染miR-23b对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及自噬相关蛋白p62、LC3B、Beclin-1表达水平的变化。结果显示:miR-23b能够改善Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞的凋亡水平和异常的线粒体膜电位,并缓解Aβ25-35引起的神经细胞凋亡蛋白和自噬蛋白表达的异常,提示miR-23b能够改善Aβ25-35导致的凋亡通路和自噬通路异常,进而缓解Aβ25-35导致的神经细胞凋亡。
    Available online:2021-04-29, DOI:
    摘要:
    阿尔茨海默症(Alzheimer's disease, AD)是引发老年痴呆的主要原因,约占患者总数的60%~80%。但是,能够治愈或者延缓疾病进程的药物极度匮乏。淀粉样蛋白(Aβ)与AD的发展密切相关,然而靶向不可溶Aβ斑块的药物至今没能成功上市。最新的研究发现,可溶的Aβ寡聚体是更强的神经毒性物质,在疾病症状出现前10多年已经存在于大脑中,引发神经组织的损伤。Aβ寡聚体形成斑块沉积在大脑中可能是人体的一种保护机制。目前,多个针对Aβ寡聚体的小分子和单抗在临床II期和III期试验中显著改善患者认知,极有潜力成为AD的有效治疗药物。本文综述了基于Aβ寡聚体的AD药物研究进展,分析其结构特点、作用机制、临床前和临床数据,探讨该领域的发展前景和方向,为AD药物研究提供新的策略。
    Available online:2021-04-22, DOI:
    摘要:
    CRISPR-Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated)系统是在细菌和古细菌基因组中发现的一种由RNA介导、抵挡外源核酸入侵的 “适应性免疫系统”。通过对靶标位点的特异性识别,结合细胞自身的DNA修复功能或转录调控机制,CRISPR-Cas系统可高效编辑靶标序列或精准调控基因的表达,目前已被开发成为基因编辑领域的有力工具。根据效应复合物组成形式的不同,CRISPR-Cas系统分为Class 1(type I、type IV和type III)和Class 2(type II、type V和type VI)两大类。Class 2类中的CRISPR-Cas9系统作为最早发现且被研究透彻的系统之一,其应用范围已十分广泛;而Class 1虽占整个CRISPR-Cas系统的90%,但目前还未有开发成熟的应用工具。本文以Class 1类的 type I系统为例,从亚型分类、Cascade复合物组装与结构、Cas3蛋白的切割降解机制以及近几年在基因编辑中的应用等方面进行总结阐述,为更好地研究该类别的作用机制及后期的开发应用提供新的思路和方法。
    Available online:2021-04-19, DOI:
    摘要:
    寻找中国仓鼠卵巢(CHO)细胞染色体上稳定表达位点是解决CHO细胞长期培养表达不稳定问题的有效手段。本课题组利用慢病毒转染将示踪基因(ZsGreen1)整合CHO细胞染色体上并发现多个潜在稳定表达位点。本研究验证了其中一个位点稳定表达外源蛋白的能力,该位点位于染色体NW_003614241.1上148052~148157 bp区域。首先观察ZsGreen1基因的表达情况,随后采用CRISPR/Cas9技术将增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因定点整合至该位点,获得3株EGFP基因定点整合的细胞,经60代悬浮培养,细胞荧光强度无明显变化,证明此位点可稳定表达EGFP基因。采用同样方法构建了表达人血清白蛋白(HSA)基因的重组CHO细胞株,经Western blot验证,此位点可分泌表达HSA。表明上述位点可定点整合稳定表达外源蛋白。
    Available online:2021-02-08, DOI:
    摘要:
    为评价自研的沙格列汀二甲双胍缓释片与参比制剂体外释放行为的一致性,分别在pH 1.0 盐酸溶液、pH 4.5 醋酸盐缓冲液、pH 6.8 磷酸盐缓冲液与纯化水四种溶出介质中比较自研制剂和参比制剂间溶出曲线的相似性,并对自研制剂和参比制剂在pH 1.0盐酸溶出介质中的凝胶形态和凝胶强度进行比较;结果显示在四种溶出介质中,自研制剂和参比制剂中沙格列汀的15 min溶出度均大于85%,盐酸二甲双胍的?2相似因子分别为89、83、80、86,均大于50,两种药物的溶出行为均与参比制剂一致;自研制剂亲水凝胶骨架的体积膨胀率、吸水增重率、溶蚀率与参比制剂间的差值百分比均小于5%,与参比制剂一致;自研制剂的凝胶强度与参比制剂一致。结果表明自研制剂和参比制剂体外释放行为一致,为体内生物等效性试验提供了良好的保障。
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    2016,47(3):259-266, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20160302
    [摘要] (3302) [HTML] (0) [PDF 1.56 M] (39770)
    摘要:
    Hedgehog信号通路调控肿瘤增殖、周期调控、侵袭转移等生理过程,维持着肿瘤的发生与发展。研究发现Hedgehog信号通路在多种耐药肿瘤的异常激活,进一步研究证实该通路通过激活靶基因以及与其他通路相互作用等方式介导了肿瘤耐药。因此,Hedgehog信号通路已然成为逆转肿瘤耐药的重要靶点。本文就Hedgehog信号通路传导途径及近年来在肿瘤耐药机制研究中的现状作一综述。
    1985(2):77-78, DOI:
    [摘要] (2299) [HTML] (0) [PDF 167.36 K] (10684)
    摘要:
    我国古代药物学的典籍多以“本草”为名,历代诸家本草都收载了丰富的药物知识,反映了各个历史阶段药物发展的特点和成就。“本草”也兼有药物的含义。自从有了“西医”、“西药”,随之产生了“国医”、“国药”,“中医”、“中药”的名称,中药就成了中医所用药物的统称。西医所用药物以化学药物为主,中医所用中药则多为植物、动物、矿物类等天然药物。久而久之,人们对古人“诸药以草为本”的概念日益加深了。从事中药者,也多认为中药一般是指中医应用的天然药材及其加工品,与化学的关系不大。有的一听说中药用化学方法研究就
    2010,41(5):385-394, DOI:
    [摘要] (5464) [HTML] (0) [PDF 1.18 M] (9286)
    摘要:
    前列腺素是一类具有广泛生理活性的内源性化合物,目前发现的天然前列腺素有20多种,而合成的前列腺素类化合物大约有2 000种,临床上可用作消化系统、心血管系统、生殖系统疾病用药及治疗青光眼。该类化合物体内的受体类型多,可以偶联G蛋白介导多种生理病理过程,例如哮喘、疼痛和炎症等。本文主要以前列腺素受体为分类依据,综述各类受体的特性以及相关药物的临床应用和研究进展。
    2010,41(1):55-59, DOI:
    [摘要] (5000) [HTML] (0) [PDF 969.51 K] (8864)
    摘要:
    目的:研究大鼠灌胃给予含附子汤剂后乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的药动学。方法:4组大鼠分别灌胃给予四逆汤(药液a)、附子水煎液(药液b)、附子加炙甘草水煎液(药液c)及附子加干姜水煎液(药液d),用LC-MS-MS 方法测定大鼠血浆中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的浓度,采用DAS 2.0 计算药动学参数。结果:4种不同配伍方给药后,乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的药动学参数有差异。与附子水煎液比,炙甘草与附子配伍,使乌头碱、新乌头碱和次乌头碱3个成分的tmax延迟,MRT0-t延长,且血药浓度-时间曲线出现多峰现象;由干姜及炙甘草配伍附子的四逆汤给药后tmax延迟,MRT0-t缩短。结论:药材配伍对相同成分的药动学行为有影响。
    2018,49(2):136-146, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20180202
    [摘要] (1357) [HTML] (0) [PDF 2.90 M] (8862)
    摘要:
    富勒烯是一种有效的自由基清除剂和抗氧化剂,对富勒烯进行化学修饰得到的富勒烯衍生物具有良好的水溶性及生物活性。富勒烯及其衍生物具有抗氧化、细胞保护、抗微生物、光动力、载带药物和肿瘤治疗等多种活性,在医药领域发挥着重要作用,近几年这方面的研究又取得了较大进展。本文从调控肿瘤微环境、应用于药物载体和光动力疗法、抗氧化应激4个方面综述了富勒烯及其衍生物在医药领域的最新应用研究进展,并对其在医药领域的未来发展及应用进行展望。
    2010,41(2):97-103, DOI:
    [摘要] (5421) [HTML] (0) [PDF 539.59 K] (8832)
    摘要:
    真核生物基因的调控机制是当前分子生物学较为活跃的研究领域之一,而转录水平的调控是基因发挥功能的一个复杂过程。转录因子因其存在的广泛性和调控靶基因的多样性,与肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡、浸润转移及血管生成等各个环节密切相关。随着对转录因子及其作用机制的深入研究,针对转录因子活化与抑制从不同环节寻找药物用于靶向治疗和预防与转录因子调控相关的肿瘤疾病,已成为当今新的研究热点,有望成为研究新型抗肿瘤药物作用机制的有效途径。
    2012,43(5):475-480, DOI:
    [摘要] (3727) [HTML] (0) [PDF 947.09 K] (8810)
    摘要:
    药物的固体形态直接影响其安全性与有效性,共晶和盐作为两种不同的固体形态,可有效改善药物的理化性质,是目前制药工业领域的研究热点。本文归纳并总结了共晶和盐的研究现状,结合FDA最新发布的《药物共晶监管分类指南》,根据各自的物理结构差异,阐明了共晶和盐的不同定义,讨论了两者在提高药物溶解度、稳定性和生物利用度等方面的作用和可能存在的问题,介绍了一些重要的鉴别共晶与盐的现代分析方法。
    2016,47(3):267-274, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20160303
    [摘要] (2314) [HTML] (0) [PDF 1.07 M] (7582)
    摘要:
    基因毒性杂质或者潜在基因毒性杂质,严重威胁人类健康,需要严格控制药物中这类杂质的限度。由于此类杂质检测在灵敏度、选择性、待测物稳定性、基质复杂性等方面呈现特殊要求,因此在分析方法的开发和选择上具有与其他药物杂质检测不同的特点。本文对药物中常见的基因毒性杂质卤代烷烃、磺酸酯、肼类化合物、环氧化物和酰卤类化合物的检测方法进行了综述,为更好地选择基因毒性杂质控制方法提供理论参考。
    2013,44(2):97-104, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20130201
    [摘要] (2179) [HTML] (0) [PDF 1.03 M] (7388)
    摘要:
    近年来现代药剂学发展迅速,新型药物递送系统成为药剂学领域的研究热点和难点。新型药物传递系统对于减少药物不良反应、提高药物疗效、保障用药安全具有重要意义,尤其在国外已成为药物制剂领域一新的研究方向和市场走向。本文就有机药物递送系统、无机药物递送系统以及生物药物递送系统的最新研究进展进行了综述。
    2011,42(2):97-106, DOI:
    [摘要] (6394) [HTML] (0) [PDF 1.12 M] (7142)
    摘要:
    糖尿病是一种慢性代谢性疾病,其主要表现为高血糖及微血管并发症,是影响人类生活的重大疾病之一。随着对糖尿病发病机制的深入研究,糖尿病药物研究也从对传统机制的药物研究过渡到对具有新作用靶点和新作用机制的药物研究。其中一些药物已经上市或正处于临床研究阶段,如胰高血糖素样肽-1受体激动剂、二肽基肽酶-4抑制剂、G蛋白偶联受体119激动剂、钠-葡萄糖同向转运体-2抑制剂、11β-羟基固醇脱氢酶1抑制剂以及蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂等。本文按作用靶点和机制分类对上述新型抗糖尿病药物进行了综述。
    2016,47(2):125-133, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20160201
    [摘要] (1945) [HTML] (0) [PDF 1.73 M] (6970)
    摘要:
    随着纳米技术的发展及肿瘤微环境研究的深入,基于肿瘤微环境设计的刺激响应型智能纳米药物载体在抗肿瘤药物递送系统中受到了广泛瞩目。该智能纳米药物载体可在体内稳定转运,抵达肿瘤靶组织或靶细胞后在肿瘤微环境刺激下载体结构发生响应,有效控制负载药物的转运部位和释放速度,从而显著提高靶点药物浓度,增加其抗肿瘤活性并降低其不良反应。常见的肿瘤微环境刺激因子有:pH、还原物质、酶浓度、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、三磷酸腺苷(adenosine-5′-triphosphate,ATP)等。本文主要从pH响应型、酶响应型、还原响应型、ROS响应型、ATP响应型智能给药系统5个方面,综述了肿瘤微环境刺激响应型智能纳米药物载体在抗肿瘤领域的新研究与新进展,并对其未来的研究方向进行了展望。
    2012,43(1):9-15, DOI:
    [摘要] (2888) [HTML] (0) [PDF 1.31 M] (6919)
    摘要:
    靶向给药系统一直是药剂学研究的热点,但人体内非常复杂的环境明显影响了靶向治疗的效果。为应对体内复杂环境,近年来科学家们在设计靶向给药系统时采取了多种措施,其中包括智能型给药系统和自适应性给药系统。通过对给药系统进行多重复合设计,可以使给药载体顺利通过血液屏障,靶向到特定细胞,进而深入靶向到细胞器,更好地发挥药物的疗效。本文介绍了这方面的研究进展。
    2012,43(2):107-112, DOI:
    [摘要] (3714) [HTML] (0) [PDF 1.10 M] (6786)
    摘要:
    随着人们对恶性肿瘤生物学认识的加深,一些新的抗肿瘤策略不断出现。例如之前已有基于肿瘤中的癌基因依赖现象的分子靶向疗法成功用于临床,而合成致死成为当下抗肿瘤药物发展的又一新的方向。研究表明,PARP-1与BRCA1/2之间为合成致死的关系。本文对PARP-1抑制与BRCA1/2缺陷如何构成其合成致死作用以及此作用在抗肿瘤中的潜在应用价值进行综述。
    2012,43(6):567-572, DOI:
    [摘要] (1869) [HTML] (0) [PDF 1.38 M] (6662)
    摘要:
    介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs)是一种新型的无机纳米粒子,近年来将其作为药物递送系统的研究受到广泛关注。本文对MSNs的制备、安全性、载药行为、在药物递送领域的应用等方面的研究进展加以综述。
    2010,41(1):1-10, DOI:
    [摘要] (7184) [HTML] (0) [PDF 1.09 M] (6613)
    摘要:
    肿瘤微环境是在肿瘤生长过程中,由肿瘤细胞、免疫细胞、内皮细胞及细胞外基质等共同构成的局部稳态环境,在肿瘤演进的过程中起着非常关键的作用。其作为多糖抗肿瘤治疗新靶点的提出,为多糖类药物的研发提供了一个新的思路。本文总结了近几年来有关肿瘤微环境的研究进展,并对多糖在肿瘤微环境调控过程中存在的机制进行了综述。
    2017,48(1):110-116, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20170117
    [摘要] (989) [HTML] (0) [PDF 1.00 M] (6341)
    摘要:
    自噬是机体保守的自我防御机制,是将细胞内变形坏死的细胞器和多余蛋白降解为小分子,以供循环利用。自噬在生理和病理状态下均发挥重要作用,可通过多条信号通路影响胞内物质的表达。目前已知Ras/Raf/MEK/ERK信号通路不仅广泛参与调控细胞生长、增殖、分化、凋亡等多个生理病理过程,并且参与调控自噬,并具有促进肿瘤细胞发生自噬性死亡的作用,但是其具体参与调控自噬的作用机制尚未完全阐明。本文就Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与调控自噬的作用的研究进展进行详细阐述,以期为研究Ras/Raf/MEK/ERK信号通路调控自噬的作用机制提供参考。
    2010,41(1):91-96, DOI:
    [摘要] (2512) [HTML] (0) [PDF 1.01 M] (6037)
    摘要:
    定量药理学是上个世纪末在传统的药动学基础之上形成的新型学科,其主要运用数学及统计学的方法定量描述、解释和预测药物在体内的作用行为。近年来定量药理学中涉及的模型化和仿真预测在新药研发、治疗药物监测和临床个体化用药等方面得到了广泛的重视和研究。本文主要从新药研发和临床治疗药物监测这两个方面综述了定量药理学国内外研究进展。
    2017,48(3):361-370, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20170318
    [摘要] (1178) [HTML] (0) [PDF 2.19 M] (5733)
    摘要:
    吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是介导色氨酸沿犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶。IDO1在肿瘤细胞和抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC)中存在过度表达现象,通过色氨酸的消耗及其代谢产物的聚积抑制局部免疫应答,使肿瘤细胞逃避免疫系统的监测,这与多数肿瘤治疗的不良预后有关。因此,IDO1是肿瘤免疫疗法的重要靶点。目前有多种骨架的IDO1抑制剂正在研究当中,其中3个已经进入了临床研究阶段。本文介绍了IDO1在肿瘤免疫耐受中的作用,并按结构分类,综述了IDO1抑制剂的研究进展。
    2015,46(3):279-288, DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20150304
    [摘要] (1953) [HTML] (0) [PDF 1.15 M] (5676)
    摘要:
    治疗性单克隆抗体是目前新药研发的一个热点。和小分子药物相比,单克隆抗体药物相对分子质量大,与靶点的结合具有更高的特异性和选择性。用于描述其药代动力学(PK)和药效学(PD)行为的PK模型和PK/PD模型也有了新的发展。本文从吸收、分布、消除等方面综述了单克隆抗体药物的PK特征,对当前用于该类药物PK研究的靶点介导药物处置(TMDD)模型和生理药代动力学模型(PBPK)进行了介绍,并基于药物与靶点作用的4类应用(免疫毒性治疗、靶细胞消除、改变细胞功能和靶向给药)分别介绍了单克隆抗体药物的PK/PD模型。
    2010,41(4):317-320, DOI:
    [摘要] (6429) [HTML] (0) [PDF 466.63 K] (5339)
    摘要:
    报道了拉帕替尼二对甲苯磺酸盐一水合物(1)的合成工艺研究。以6-碘喹唑啉-4-酮(3)为起始原料,依次经氯化反应(收率88%)、与5-甲酰基呋喃-2-硼酸的Suzuki偶联反应(收率96%)、与2-(甲砜基)乙胺的还原胺化(收率94%)、与一水合对甲苯磺酸成盐(收率87%)和四氢呋喃-水(8∶2)结晶(收率70%)等5步操作制备目标产物1,总收率48%。各中间体和目标产物经1H NMR、13C NMR、ESI-MS表征。在工艺优化中革除了柱色谱及对环境不友好的过量氯化剂、含卤溶剂,采用易于回收的非均相催化剂钯炭替代昂贵和难以处理的均相催化剂。所研制的合成工艺路线各步收率均较高,而且操作简便,无需特殊试剂和条件,预期适合工业化生产的要求。

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